岛津色谱柱的选购指南详解:
一、明确色谱柱类型:
1.按分离模式选择
正相色谱(NPC):固定相为极性填料(如硅胶),适用于极性化合物分离(如油脂、药物中间体)。
反相色谱(RPC):固定相为非极性填料,适用于非极性或弱极性化合物(如多环芳烃、生物大分子)。
离子交换色谱(IEC):用于带电分子分离(如蛋白质、氨基酸),可选强酸性(磺酸基)或强碱性(季铵基)交换柱。
体积排阻色谱(SEC):基于分子大小分离(如蛋白质、多糖),填料为多孔硅胶或凝胶。
手性色谱(Chiral HPLC):专用于对映体分离,填料为环糊精、纤维素衍生物等。
2.特殊应用型色谱柱
宽孔径柱(Wide Bore):内径较大,适合制备色谱或低流速分析。
窄孔径柱(Narrow Bore):内径较小,适用于高灵敏度检测或微量样品分析。
快速分离柱(Fast Chromatography):短柱或超细颗粒填料,缩短分析时间。
1.确定分离目标
样品类型(极性、分子量、浓度)?
需要高分辨率还是高通量?
2.匹配仪器性能
仪器耐压:亚2μm柱需UHPLC系统。
检测器兼容性:荧光/质谱检测需低荧光背景柱。
3.参考流动相条件
反相色谱:甲醇/水或乙腈/水(缓冲盐调节pH);
正相色谱:正己烷/异丙醇。
4.验证柱性能
测试标准品分离度;
对比不同品牌柱的塔板数、对称因子。
三、岛津色谱柱维护与寿命延长:
1.储存条件
反相柱:保存在甲醇/水中(避免纯水导致填料塌陷);
正相柱:保存在正己烷中(防止吸潮)。
2.清洗步骤
反相柱:依次用甲醇、水、甲醇冲洗,去除残留盐或蛋白质;
离子交换柱:用高浓度盐溶液再生,再用水平衡。
3.避免损伤
禁止干涸填料(始终浸泡在流动相中);
样品需过滤,防止颗粒堵塞柱床。
