一、沃特斯色谱柱的存放:
1.避免干燥存放
色谱柱在使用后或长时间不使用时,不能直接暴露在空气中,否则会导致填料干燥、开裂或失效。
应将色谱柱充满保存溶剂(通常为甲醇、乙腈或水,具体根据柱型而定),并密封柱两端。
2.选择合适的保存溶剂
反相色谱柱(如C18柱):保存溶剂通常为甲醇或乙腈(纯有机溶剂),避免使用纯水(可能滋生微生物)。
正相色谱柱(如硅胶柱):保存溶剂通常为正己烷或庚烷。
特殊柱型:参考柱厂商推荐的保存溶剂(如离子交换柱需保存在特定pH的缓冲液中)。
3.温度控制
存放环境应避免高温或低温极*条件,推荐温度为室温(15~25℃)。
长期存放时,可置于阴凉处,避免阳光直射。
4.密封保存
使用专用柱帽或封口装置密封色谱柱两端,防止保存溶剂挥发或污染。
若色谱柱自带密封阀,确保阀门处于关闭状态。
1.冲洗色谱柱
每次使用后:用适当的溶剂冲洗色谱柱,清除残留样品或杂质。
反相柱:先用甲醇-水(50:50)冲洗,再用纯甲醇或乙腈冲洗。
正相柱:用正己烷或异丙醇冲洗。
长期存放前:确保色谱柱内无盐分、缓冲液或强极性样品残留,避免填料污染或堵塞。
2.避免压力冲击
使用色谱柱时,缓慢调节流速和压力,避免突然升高压力导致填料压缩或损坏。
避免在高压下直接进样,建议使用样品预过滤器。
3.防止污染
确保流动相和样品经过过滤(0.22μm或更小孔径滤膜),避免颗粒物堵塞色谱柱。
定期更换流动相,避免微生物滋生(可添加适量防腐剂如叠氮钠)。
4.控制pH范围
硅胶基色谱柱(如正相柱)对pH敏感,避免使用强酸性或强碱性流动相(通常pH范围为2~8)。
反相柱对pH耐受性较好,但长期使用极*pH仍可能损伤填料。
5.避免高浓度盐或缓冲液
高浓度盐或缓冲液可能沉积在填料表面,导致柱效下降。使用后应及时用纯水或有机溶剂冲洗。
