沃特斯色谱柱常见问题与解决方法:
1.柱压升高
原因:填料堵塞、样品残留或污染。
解决方法:反向冲洗色谱柱,或用适当溶剂清洗;若柱压持续升高,可能需要更换色谱柱。
2.峰形变宽或分裂
原因:填料损坏、污染或流动相不合适。
解决方法:检查流动相组成,清洗或再生色谱柱。
3.保留时间变化
原因:固定相流失或污染。
解决方法:用纯溶剂冲洗色谱柱,必要时进行柱再生。
4.微生物滋生
原因:水相流动相长期存放导致霉菌生长。
解决方法:添加防腐剂(如0.01%叠氮钠),或定期用有机溶剂冲洗。
1.柱再生
根据柱型选择适当的再生方法:
反相柱:用纯甲醇或乙腈冲洗,去除疏水性杂质。
正相柱:用正己烷或异丙醇冲洗,去除亲水性杂质。
若柱效显著下降,可尝试用厂商推荐的再生程序(如高温冲洗或酸碱处理)。
2.修复轻微污染
对于轻微污染的色谱柱,可用以下方法修复:
反相柱:用甲醇-水(10:90)混合液冲洗。
正相柱:用氯仿或甲醇冲洗。
3.及时更换老化柱
若色谱柱性能严重下降(如峰形畸变、保留时间不稳定等),建议更换新柱,避免影响实验结果。
沃特斯色谱柱使用注意事项:
1.严格遵守操作规范
避免超过色谱柱的最大耐压、温度或pH范围。
进样前确保样品清澈无颗粒。
2.记录使用情况
记录色谱柱的使用次数、流动相组成、样品类型等信息,便于追踪性能变化。
3.定期维护
每月检查色谱柱性能(如测试标准品保留时间和峰形),及时发现问题。
