判断SPE固相萃取小柱的性能好坏需从吸附能力、选择性、重现性、回收率、流速控制、抗干扰能力及物理稳定性等核心指标综合评估。以下为具体判断方法及关键点:
吸附能力直接影响目标化合物的富集效率,需通过以下方法验证:
1.吸附容量测试
方法:向SPE小柱中加入已知浓度的标准溶液,逐步增加体积直至小柱达到饱和(即流出液中目标物浓度与初始浓度一致)。
判断标准:吸附容量(mg/g)越高,说明填料对目标物的吸附能力越强。
2.保留体积测试
方法:用弱溶剂(如水)冲洗小柱,记录目标物开始流出时的体积(保留体积)。
判断标准:保留体积越大,说明填料对目标物的保留能力越强,适用于高水溶性化合物的富集。若保留体积过小,可能导致目标物提前流失。
二、SPE固相萃取小柱选择性:避免干扰的关键
选择性反映小柱对目标物与干扰物的分离能力,需通过以下实验验证:
1.基质干扰实验
方法:在复杂基质中添加目标物标准品,经SPE小柱处理后,检测目标物回收率及干扰物残留。
判断标准:若回收率>80%且干扰物去除率>90%,说明选择性良好。
2.竞争吸附实验
方法:向小柱中同时加入目标物和结构相似物(如同系物、异构体),检测目标物回收率。
判断标准:若目标物回收率不受竞争物影响(波动<10%),说明选择性优异。
三、SPE固相萃取小柱重现性:保证实验可靠性的基础
重现性反映小柱批次间或柱间的一致性,需通过以下实验验证:
1.批次间重现性
方法:使用同一品牌不同批次的SPE小柱处理相同标准溶液,检测目标物回收率及峰面积RSD(相对标准偏差)。
判断标准:RSD<5%为优秀,5%-10%为可接受,>10%需谨慎使用。
2.柱间重现性
方法:随机选取同一批次的多根SPE小柱,重复上述实验。
判断标准:柱间RSD应与批次间RSD一致,若偏高,可能存在生产缺陷(如填料装填不均匀)。
