SPE固相萃取小柱的作用机理基于液-固相色谱理论，通过选择性吸附与选择性洗脱实现目标物的分离、纯化和富集，其核心原理及关键步骤如下：
1.选择性吸附
当复杂样品溶液通过SPE小柱时，吸附剂（如硅胶键合相、聚合物等）通过极性相互作用、疏水作用、离子交换或螯合作用等，选择性保留目标化合物及少量性质相近的组分，而其他杂质则随流动相（样品基质）流出小柱。
示例：在反相萃取中，非极性吸附剂（如C18）会优先吸附非极性目标物（如药物分子），而极性杂质（如糖类、无机盐）则直接穿透。
2.选择性洗脱
通过调整洗脱溶剂的极性、pH或离子强度，打断目标物与吸附剂之间的相互作用力，使其从吸附剂上解吸并随洗脱液流出，实现目标物与残留杂质的分离。
二、SPE固相萃取小柱关键步骤与影响因素
1.活化（Activation）
目的：使吸附剂表面官能团充分展开，并去除可能存在的干扰物质。
方法：反相柱常用甲醇润湿，正相柱用非极性溶剂（如正己烷）处理。
影响：活化不足可能导致吸附效率下降，活化过度可能破坏吸附剂结构。
2.上样（Loading）
目的：将样品溶液通过SPE柱，使目标物被吸附剂保留。
条件：需控制样品溶剂的极性。例如，反相萃取中样品应溶于水或低比例有机溶剂，以避免目标物直接穿透。
风险：若样品基质复杂（如含大量蛋白质或颗粒物），可能堵塞筛板或竞争吸附位点，导致回收率降低。
3.淋洗（Washing）
目的：去除与目标物性质相近的干扰杂质，同时避免目标物损失。
方法：选择与上样溶剂极性相近但洗脱强度稍强的溶剂。例如，反相柱可用5%甲醇-水冲洗。
平衡点：需在净化效果与回收率间找到优解，避免过度淋洗导致目标物流失。
4.洗脱（Elution）
目的：用强洗脱溶剂将目标物从吸附剂上解吸并收集。
方法：洗脱溶剂的极性应与目标物-吸附剂相互作用力匹配。例如，反相柱常用100%甲醇或乙腈洗脱。
优化：可通过梯度洗脱或分步洗脱提高选择性，减少杂质共洗脱。
更新时间：2025-12-10 
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